제품명 ：인외주혈 림프구 분리액

제품 사양 ：200ml

저장 조건::RT，빛을 피하다

유효 기간12개월

제품 소개:본 제품은 사람의 외주혈림프구를 분리하는 데 사용되는 무균, 저내독소 수준의 밀도 경도 분리액이다.그 분리 원리는 혈구의 밀도 차이(적혈구와 입자세포의 밀도는1.090 g/mL좌우;림프구와 단핵세포의 밀도는1.075~1.090 g/mL; 혈소판은1.030~1.035 g/mL), 원심분리를 통해 일정한 밀도의 세포를 상응한 밀도에 따라 경도적으로 분포시켜 림프세포를 인외주혈이나 제대혈에서 분리한다.

제품 지표:밀도1.077±0.001g/mL삼투압290 ~ 350 mOsm / kg H2O무균0.1μm여과막 여과

저장 기준:본 제품은 빛에 민감하므로, 실온에서 빛을 피하여 보관하여야 하며, 유통기한은1 년.무균은 개봉 후 실온에 보관한다.

작업 단계:1. 신선한 항응고 전혈(EDTA는, 구연산나트륨 또는 헤모글로빈 항응고) 또는 섬유질 단백질 혈액을 제거하고 같은 부피의 전혈 및 조직 희석액 또는PBS는전혈을 희석하다.2. 원심관에 적당량의 분리액을 첨가하다 (희석 후 혈액 부피가 작으면3ml시, 가입3ml분리액;이상3ml, 등체적분리액을 첨가한다.그러나 양자의 총 부피는 원심관의 3분의 2를 초과해서는 안 된다. 그렇지 않으면 분리 효과에 영향을 줄 수 있다.) 희석된 혈액을 분리액 액면 위에 평평하게 깔아 양액면 계면이 선명하게 유지되도록 주의해야 한다.(배스드 빨대를 사용하여 혈액을 빨아들인 다음 분리액에 조심스럽게 혈액을 평평하게 깔 수 있다. 둘의 밀도 차이로 인해 뚜렷한 계층 인터페이스가 형성된다. 시료가 비교적 많고 시료가 더 오래 추가되면 원심분리 전에 적혈구가 뭉쳐 가라앉는 것은 정상적인 현상이다.)

3. 실온, 수평 로터500~1000g, 원심20~30분혈액의 부피가 클수록 원심력이 커져요 원심력시간이 길수록 가장 좋은 분리 조건은 모색해야 하며, 원심 회전 속도는 최대 초과하지 않는다1200g）。4. 원심분리 후 뚜렷한 층이 나타날 것이다: 최상층은 희석된 혈장층이고, 중간은 투명한 분리액층이며, 혈장과 분이다이액 사이의 백막층은 림프세포층이고 원심관 밑부분은 적혈구와 입자세포이다.5. 백막층 세포를 조심스럽게 흡수해서15ml깨끗한 원심관 속,10mL PBS는또는 세포 세척액이 백막층 세포를 세척한다.250g, 원심10분。6. 상청을 버리고,5mL의의PBS는또는 세포 세척액 중현세포,250g, 원심10분。7. 반복 단계68. 상청 (上淸) 을 버리면 세포가 다시 걸려 준비된다.

분리 순도:사람 림프 세포 분리액을 사용하여 림프 세포를 분리하는 분리 순도는90%。

참고 사항:A.개봉 전에 거꾸로 혼합하여 본 분리액은 무균 제품이므로 분리액의 보존 시간을 연장하기 위해 무균 조건에서 개봉하여 미생물 오염을 피하십시오.B.분리액을 사용할 때는 항상 실온을 유지해야 한다(18℃~25℃) 실내 온도가 낮으면 분리액을 예열할 수 있다.4℃ 나 온도가 낮은 조건에서 원심을 분리하면 백막층의 적혈구 오염이 심해질 수 있다.C.혈액 샘플은 신선한 항응혈 (채혈) 이 가장 좋다2시간이내), 림프구의 활성을 유지하기 위해서는 냉동과 냉장을 피해야 한다.D.혈액 희석 또는 세포 세척, 사용 불가 함유Ca는、Mg는이온의 완충액 및 배양액은 그 성분이 혈구를 응집시켜 세포의 득률과 순도를 크게 낮춘다.E.폴리스티렌과 같은 일부 플라스틱 제품은 정전기 작용으로 인해 세포가 벽에 걸려 분리 효과에 영향을 줄 수 있습니다.F.혈액 샘플의 끈적임이나 온도 차이는 분리 효과에 영향을 줄 수 있으며, 원심 회전수와 원심 분리 시간을 조절하고 최적의 분리 조건을 모색할 수 있다.G.너무 많은 림프세포층과 분리액층을 섭취하면 분리액의 경계에 있는 입자세포가 흡수되어 혼합된 입자세포의 수가 증가한다.혈장층을 너무 많이 섭취하면 림프구의 혈장단백질 및 혈소판 오염을 초래할 수 있다.H.분리된 세포를 더 배양하려면 혈액을 수집하고 분리하는 과정에서 무균 조작에 주의해 미생물 오염을 피해야 한다.난서로 다른 동물의 혈액이 서로 다른 비중 분리액 중의 세포 이산 계수 및 세포 대전체가 다르기 때문에, 사용자는 분리액을 제정할 때 필요한 분리액의 비중, 동물 종속 및 분리된 세포의 명칭을 제공해야 한다.