본 시약함은 과학 연구에만 사용할 수 있으며, 의학 진단에는 사용할 수 없습니다.

사람 (인간）포도당 - 6-인산탈수소효소(G6PD)

ELISA 검사 키트

사용 설명서

검측 원리

시약함은 이중 kàng체 1단계 협심법 효소연면역흡착시험(ELISA)을 사용한다.포도당-6-인산탈수소효소(G6PD) kàng체를 미리 싼 가방 이불 미세구멍에 표본, 표준품, HRP로 표시된 검출 kàng체를 차례로 넣어 온육하고 chè 밑으로 세탁한다.바탕물인 TMB로 발색하면 TMB는 과산화물 효소의 촉매로 파란색으로 바뀌고 산의 작용으로 최종 노란색으로 바뀐다.색상의 깊이는 시료의 포도당-6-인산탈수소효소(G6PD)와 상관관계가 있다.효소표시기로 450nm 파장에서 흡광도(OD값)를 측정해 시료 활성도를 계산한다.

샘플 수집, 처리 및 보존 방법

1.혈청: 열원과 내독소가 함유되지 않은 시험관을 사용하여 조작과정에 그 어떤 세포자극도 피면하고 혈액을 수집한후 3000전리심 10분간 혈청과 적혈구를 신속하고 조심스럽게 분리한다.

2.혈장: EDTA, 구연산염 또는 간소항응고.3000원 원심분리 30분에 찾아.

3. 세포상청액: 3000 원심분리 10분간 입자와 중합물을 제거한다.

4. 골고루 섞기: 조직에 적당량의 생리식염수를 넣고 으깬다.3000원 원심분리 10분 만에 청산.

5.보존: 만약 샘플을 수집한 후 제때에 검측하지 않으면, 1회 용량에 따라 나누어 포장하고, -20 ℃ 에 얼려 보관하며, 반복적으로 얼지 않도록 하고, 실온에서 해동하며, 샘플이 균일하게 충분해 얼도록 확보한다.

자체 물품

1. 효소표시기(450nm)

2. 고정밀 샘플링 머신 및 총 헤드: 0.5-10uL, 2-20uL, 20-200uL, 200-1000uL

3.37 ℃ 항온상자

운영 고려 사항

1. 시약함은 2-8 ℃ 에 보관하고 전실온을 사용하여 20분 동안 균형을 잡는다.냉장고에서 꺼낸 농축 세척액에는 결정이 있을 수 있는데, 이는 정상적인 현상에 속하며, 수욕 가열로 결정 wán을 완전히 용해시킨 후 사용한다.

2.실험에서 사용하지 않는 판자는 즉시 자봉봉지에 넣고 밀봉(저온건조)하여 보관해야 한다.

3.농도 0의 S0호 표준품은 음성 대조 또는 공백으로 볼 수 있다;설명서에 따라 조작할 때 견본은 이미 5배 희석되였고 최종결과에 5를 곱해야 견본의 실제농도이다.

4.설명서에 명시된 시간, 가액량 및 순서에 따라 엄격히 온육조작을 진행한다.

5. 모든 액체를 조합하여 사용하기 전에 충분히 흔들어 줍니다.

시약함 구성

참고: 표준품 (S0-S5) 농도: 0, 1.5, 3, 6, 12, 24 U/L

시약 준비

20×세척 완충액의 희석: 증류수는 1:20으로 희석한다. 즉 1인분의 20×세척 완충액에 19분의 증류수를 더한다.

세판 방법

1.수동 세면판: 구멍 안의 액체를 털어내고, 구멍마다 세척액을 가득 채우고, 1min 정적 후 구멍 안의 액체를 털어내고, 흡수지에 마른다. 이렇게 세면판을 5회 한다.

2. 자동세판기: 구멍당 350μL의 세척액을 주입하여 1min 담그고 5회 세판한다.

작업 단계

1.실온 균형 20min 후의 알루미늄 포일 주머니에서 필요한 판자를 꺼내고, 나머지 판자는 자봉 주머니로 밀봉하여 4 ℃ 로 돌려놓는다.

2. 표준품공과 견본공을 설치하고 표준품공에 각각 다른 농도를 더한 표준품 50μL;

3.샘플 구멍은 먼저 측정 대기 샘플 10 μL를 추가하고 샘플 희석액 40 μL를 추가합니다.빈 구멍을 넣지 않습니다.

4. 빈 구멍을 제외하고 표준품 구멍과 샘플 구멍에 매운 뿌리 과산화물 효소(HRP) 표시를 넣은 검측 kàng체 100μL, 반응 구멍을 봉판막으로 봉하고, 37℃ 수욕솥 또는 항온상자 온도 60min.

5. 액체를 버리고 흡수지를 두드려 말린다. 구멍마다 세척액을 가득 넣고 1min 정치한다. 세척액을 뿌리고 흡수지를 두드려 말린다. 이렇게 다섯 번 반복한다.

6. 구멍마다 바탕물 A, B를 각각 50μL씩 넣고 37℃에서 빛을 피해 15min 부화한다.

7. 구멍당 종료액 50μL를 넣고 15min 이내에 450nm 파장에서 구멍별 OD값을 측정한다.

결과 판단

표준 곡선 그리기: Excel 워크시트에서 표준 제품 농도를 가로 좌표로 하고 OD값에 대응하여 세로 좌표로 하여 표준 제품 선형 회귀 곡선을 그리고 곡선 방정식에 따라 각 샘플 농도 값을 계산합니다.

시약함 성능

1.정확성: 표준품 선형 회귀와 예상 농도 상관계수 R값, 0.9900보다 크다.

2.민감도: zu 낮은 검출 농도는 0.1 U/L 미만입니다.

3. 특이성: 다른 가용성 구조의 유사물과 교차 반응하지 않는다.

4.반복성: 판내, 판간 변이계수는 모두 15% 미만이다.

5. 저장: 2-8 ℃, 빛을 피하고 습기를 방지하여 보존한다.

6. 유효기간: 6개월

면책 성명

1. 시약함은 연구용으로만 제공되며 림상실험 또는 인체실험에 사용되여서는 안된다. 그렇지 않을 경우 산생된 모든 후과는 실험자가 부담하며 본사는 일체 책임지지 않는다.

2.엄격히 설명서에 따라 조작, 실험자가 설명서를 위반하여 조작, 결과는 실험자가 부담한다.