1.2.1항체의 구조

항체는 항원 특이성과 결합할 수 있는 면역 글로불린이다(면역글로부린, Ig)。Ig다섯 부류, 즉IgG는、IgA는、IgM은、IgD는와IgE는. 면역 측정과 관련된Ig주로IgG는와IgM은。Ig두 개의 라이트 체인(L) 및 두 개의 체인 (H)의 단일 구성입니다.Ig의 라이트 체인은 동일합니다.κ（kappa는) 및λ（램드다) 두 가지 유형.다섯 종류Ig의 중체인 구조가 다르기 때문에 그것들의 항원성도 다르다.IgG는와IgM은의 체인은 다음과 같습니다.γ（伽마) 체인 및μ（mu를) 체인입니다.

무거운 체인과 가벼운 체인의N끝의 아미노산 배열 순서는 각종 항체에 따라 다르며, 가변 구역이라고 하며, 각각 사용한다VH는와VL은를 나타냅니다.양자 는 항체 의 항원 결합 부위 를 구성하는데, 상응하는 항원 과 클러스터 를 결정한다배합, 특이성 결합이 발생하는 것은 항체 전일성 결합 항원의 구조적 기초이다.

IgG는파파야 프로테아제에 의해 3 개의 세그먼트로 분해 될 수 있으며 그 중 2 개의 동일한 세그먼트를 항원 결합 세그먼트라고 합니다 (Fab는）。각각Fab는모두 결합 항원을 보존할 수 있지만개 항원 결합 위치는 단가이며, 항원과 결합한 후 응집이나 침전이 나타나지 않는다.다른 세그먼트 이름Fc는세그먼트, 항체 활성은 없지만IgG는*의 항원성.

IgG는위 단백질 효소에 의해 두 조각, 한 조각으로 분해될 수 있다Fab는쌍체, 칭F（아브）2, 두 개의 동일한 항원과 결합할 수 있다;다른 부분은 유사하다Fc는, 나중에 분해됨성소분자 폴리펩티드, 무생물 활성.

IgM은5개의 단일체로 이루어진 5중합체이며, 10개의 체인 및10개의 라이트 체인,10개 항원 결합 가격은 공간 위치의 영향으로 5 개 항원 결합 가격으로만 나타납니다.IgM은분자량은 대략900000，IgG는분자량은 대략150000。

유기체가 미생물에 감염되면 먼저 생긴다IgM은항체, 그리고 생성IgG는항체.시간이 지나면,IgM은항체량이 점점 줄어들면서 사라지고IgG는항체는 장기간 존재할 수 있으며 질병* 이후 수년간 지속 가능그 동안.

IgM은항체는 일반적으로 보호성 항체로 면역성을 가지고 있다.따라서IgM은항체의 측정은 A형 간염과 같은 일부 전염병에 대해 비교적 높은 임상 진단 가치가 있다.오른쪽 사진은 A형 간염환자 혈청 중IgG는항체 및IgM은항체가 나타난 시간과 수준.

1.3항원 항체 반응

1.3.1可逆性

항원과 항체가 결합하여 항원 항체 복합체를 형성하는 과정은 일종의 동적 균형으로 그 반응식은 다음과 같다.

Ag+AbAg·Ab

항체의 친화력(애피니티항원 항체 간의 고유 결합력으로, 평형 상수를 사용할 수 있다K표현:

K=[Ag·Ab]／[Ag][Ab]

Ag·Ab의 해리 정도와K값이 연관되어 있습니다.고친화력 항체의 항원 결합점과 항원의 결정 클러스터는 공간 구조에 매우 적합하며, 양자의 결합은 견고하고 쉽게 해리되지 않는다.해리이후의 항원이나 항체는 모두 원래의 구조와 활성을 유지할 수 있기 때문에 친화층 분석법으로 항원이나 항체를 정제할 수 있다.항혈청에서 특이성의IgG는항체는 전체IgG는중의 극소부분.친화층 분석법으로 추출한 특이성 항체를 친화층 분석 순항체라고 하며, 면역 측정에 응용하면 더 좋은 효과를 얻을 수 있다.

1.3.2zui 적비율

항정량의 항체에 점증량의 항원을 첨가하여 항체 복합물(침전)을 형성하는 양견도1-4. 곡선의 피크 부분은 항원 항체 비율 zui의 적절한 범위이며 등가대(동등성 지역）。등가대 전후에는 각각 항체 과잉대와 항원 과잉대다.항원이나 항체가 극도로 과잉되면 침전물이 형성되지 않아 면역 측정에서벨트 현상 (지역 현상）。항체 과량을 전대 (프리존), 항원지 과다 복용을 후대 (postzone 지역）。면역학적 방법으로 항력을 측정하고 있어요원래 반응계통에 충분한 항체량을 가지게 해야 한다. 그렇지 않을 경우 측정된 양은 실제 함량보다 작고 심지어 가음성이 나타난다.

1.3.3특이성

항원 항체의 결합은 실질적으로 항원의 항원 결정 클러스터와 항체의 항원 결합 위치 사이에서만 발생한다.양자는 화학 구조와 공간 구조에서 상호 보완 관계를 가지기 때문에 항원항체 반응은 고도의 특이성을 가지고 있다.예를 들어 B형 간염 바이러스의 표면 항원 (HBsAg의）、e항원 (HBeAg는) 및 코어 항체 (HBcAg의), 동일한 바이러스에서 유래하지만 다른 두 가지 항체와 결합하지 않고 해당 항체와 결합반응하다.항원 항체 반응의 이러한 특이성은 면역 측정으로 하여금 매우 복잡한 단백질 화합물 (예: 혈청) 에서 특정 물질을 측정할 수 있게 하며, 먼저 검사 대기물을 분리할 필요가 없다。

하지만 이런 특이성도 아니다.만약 두 화합물이 부분적으로 같은 구조를 가지고 있다면 항원 항체 반응에서 교차 반응이 나타날 수 있다.예: 융모막 촉진선 호르몬(hCG는) 및 황체 생성 호르몬 (LH는) 모두α와β두 개의 아단위로 구성되어 있는데, 그 구조의 차이점은β아단위, 그리고 양자의α아단위는 동류이다.쓰다hCG는면역동물이 얻은 항혈청에는 항이 함유되어 있다α-hCG및 저항β-hCG두 가지 항체, 항체α-hCG항체는LH는중
α효소 위치가 교차 반응을 일으키다.임상 검사에서, 예를 들면 항력hCG는항혈청은 임신 진단 시약으로 소변을 검정한다hCG는, 사용 가능hCG는농도가 높은 실험, 그렇지 않으면여성이 생리적으로 소변에 배설되는 미량LH는교차 반응을 일으킬 것이다.그래서 조임진단으로 (민감도는50mIu/mlhCG)에 대한 실제 요구 사항적용 대상hCG는특이한 저항β-hCG다른 호르몬과의 교차 반응을 피하기 위해.

1.3.4민감성

혈청의 어떤 물질의 함량을 측정할 때 화학비색법의 민감도는mg/ml의수준, 효소 반응 측정법의 민감도는 약5~10μg/ml면역 측정 중 젤 확산법과 탁도법의 민감도는 효소 반응법과 비슷하다.표시 면제전염병 측정의 민감도는 수천 배, 최대ng/ml의수평예를 들어, 방사선 면역 측정법 또는 효소 면역 측정법으로 측정HBsAg의, 그 민감도는0.1ng / ml의。

1.4면역 측정이 임상 검사에서의 응용

소분자의 반항원을 포함한 각종 항원 성분으로 인해 모두 특이성의 항혈청 또는 단클론 항체를 제조할 수 있으며, 이 항체를 시약으로 이용하면 표본 중의 상응하는 항원을 검사할 수 있다그러므로 면역측정의 응용범위가 아주 넓어 림상검사에서 측정에 사용할수 있다.

1）체액 속의 각종 단백질은 함량이 극히 적은 단백질, 예를 들면 갑태 단백질 등을 포함한다.

2）호르몬, 소분자량의 스테로이드 호르몬 등을 포함한다.

3）항생제와 약.

4）병원체 항원,HBsAg의、HBeAg는기다려.

5）또한 순화된 항원을 이용하여 표본의 항체(예를 들어 항체)를 검사할 수도 있다HBs기다려.

5. 표시된 면역 측정

앞에서 말한바와 같이 면역측정은 매우 민감한 측정방법으로서 항원항체가 반응한후 형성된 침전 또는 탁도를 직접 측정하여 민감도가 도달할수 있다.5~10μg/ml그러나 임상 검사에서 일부 대기 물질은 표본에서 이보다 훨씬 낮기 때문에 민감도를 높이는 방법을 찾아야 한다.표시된 면역 측정은검측 시약의 항원이나 항체를 미량 측정이 가능한 물질로 표시해 표시물을 측정해 민감도를 높인다.방사선 면역 측정과 효소 면역 측정에서 표기물은 각각방사성 핵소와 효소를 위해 zui를 측정한 후 방사성과 효소의 활력을 측정하여 검사 대기물의 양을 계산하면 직접 측정한 침전물보다 민감도가 수백에서 수천 배 높아진다.표기 면역 측정에서,일반적으로 측정 대기 물질 * 반응을 보장하기 위해 과량의 표시 시약을 첨가합니다.항체 표시 (Ab는^※) 항원 검사 (Ag는) 의 경우 다음과 같이 반응합니다.

Ag + Ab는^※ AgAb는^※+ Ab^※

반응산물에는Ag는결합의Ab는^※유리화Ab는^※ 을 (를) 분리하지 않고 마커를 측정하면 측정 결과가 합쳐집니다.따라서 유리 마커와 결합 마커의 분리는 마커 면역 측정의 중요한 단계입니다.채취 가능여러 가지 수단으로 고상 캐리어는 그 중의 하나이다.만약 항원 또는 항체 패키지를 고체 캐리어에 붙인 다음 표시된 항원 또는 항체와 직접 반응하면 결합된 표시물은 탑재에 고정된다몸에는 유리의 표식물이 용액에 남아 있다.이렇게 하면 세탁을 통해서 유리를 할 수 있어요.Ab는^※제거, 결합 마커의 측정은 고체상에서 할 수 있다.

6.효소 면역 측정

효소 면역 측정(효소 immunoassay)는 균등하게 나눌 수 있습니다 (동질성) 및 비균상(异종) 두 가지 유형이 있습니다.재균상EIA는보통유리된 것과 결합된 표기물을 분리할 필요 없이 직접 표기물을 측정한다.예를 들어 어떤 조건 하에서 항원 항체 반응 후 형성된 효소 표기 항원 항체 복합체 중의 효소 상실바탕물에 대한 작용의 활력으로 측정된 효소의 활력은 유리된 효소 표기물을 직접 반영한다.균상EIA는임상 검사에서 비교적 적게 응용하다.비균상EIA는먼저 유리의 합을 진행해야 한다결합된 표기물의 분리.앞에서 말한 바와 같이, 고체 캐리어는 일종의 분리 수단으로 사용할 수 있다.이런 고상효소 면역 측정 방법은1971년 zui가 처음 설립되었을 때 효소 결합 면역 흡착제라고 불렸다측정 (효소 연결 면역 흡수성 분석), 약칭ELISA는, 국내에서 역작 효소 결합 면역 흡착 실험의 경우, 비록 의미는 * 정확하지 않지만 이미 습용되었다.