일반적으로 우리는ELISA는검사한 샘플은 혈청, 혈장, 소변, 세포배양상청 또는 조직균장액 등 여러가지 류형이 있는데 부동한 류형의 검사샘플의 전단계의 처리방법은 다르다.정확한 샘플 처리는 보증ELISA는검사의 정확성과 정확성에 대한 * 단계는 다음과 같이 부동한 류형의 견본의 처리방법을 간단히 소개한다.

1、 혈청

혈청 은 Zui 가 자주 사용한다ELISA는검측의 한 종류의 샘플은 처리도 비교적 간단하다.

열원, 내독소가 없는 시험관 또는 원심관으로 혈액표본을 채취하여 시험관 또는 원심관의 실온을 놓다2시간 또는4℃ 로 밤을 보내면 혈청이 석출된다.(시험관이나 원심관을 비스듬히 놓아 액면 횡단면을 증대시켜 혈청을 더 크게 석출할 수 있다.)4℃1000×g원심20분, 자세히 수집하여 상청한다.혈청을 여러 몫으로 나누어 담는 것을 권장하고,-20℃ 또는-80℃ 로 보관하여 반복적으로 얼지 않도록 한다.

채혈 과정에서 용혈을 피해야 한다. 적혈구가 분해될 때 과산화효소의 활성을 가진 물질을 방출하기 때문이다.HRP는태그의ELISA는비특이적인 발색이 감지되어 부정확성이 발생합니다.동시에 세균 오염도 피해야 한다. 왜냐하면 균 체내에 내원성이 함유되어 있기 때문이다HRP는이로 인해 검사의 가짜 양성을 초래했다.

2、 혈장

항응고제를 함유한 채혈관이나 원심관으로 혈액표본을 채취하고, 표본을 채취한 후30분안4℃ 1000×g원심15분, 청즉혈장을 채취한다.상청을 여러 부 나누어 싣고,-20℃ 또는-80℃ 로 보관하여 반복적으로 얼지 않도록 한다.용혈이나 고지혈의 표본 사용을 피하다.

자주 사용하는 항응고제는EDTA는, 간소나트륨과 구연산나트륨 등은 검사할 때 시약함 설명서를 자세히 읽고 시약함이 항응고제에 특별한 요구가 있는지 검사해야 한다.

3、 세포배양상청

세포를 채취하여 원심관까지 배양하고,1000×g원심20분, 세포 파편과 불순물을 제거하고,-20℃ 또는-80℃ 로 보관하여 반복적으로 얼지 않도록 한다.

4、 세포분해액

1） 배양판 안의 배양기를 빨아들여 인슐린으로 세포를 소화하고 적당량의 배양기를 넣어 세포를 배양판에서 불어낸다.부유 세포는 생략할 수 있다.

2） 세포 현액을 수집하고,1000×g원심10분배양기 버리고 예냉PBS는윤색3차.

3） 적당량의 예냉을 넣다PBS는또는 세포분해액 (림용하기전에 단백질효소억제제를 첨가함.) 중현세포.보통6공판 한 구멍의 세포량 필요150~250μL PBS는다시 걸다.

4） 견본을 넣다-20℃ 또는-80℃, 샘플을 냉동시키고, 다시 실온에 넣어 샘플을 해동시키고, 몇 번 반복적으로 얼려서 세포를 충분히 분해시킨다.샘플을 초음파 파쇄하여 분해의 목적을 달성할 수도 있다.

5） 4℃10000×g의원심10분, 세포 조각을 제거하고 제거,-20℃ 또는-80℃ 로 보관하여 반복적으로 얼지 않도록 한다.

5, 조직 균일 장액

1） 조직 견본을 사용하다PBS(0.01)M의 PH 7.4）조직 표면에 남아 있는 혈액이나 불순물을 씻어내다.

2） 조직 블록 의 무게 를 재고, 기록 후 에 잘게 썰고, 조각 은 가능한 한 작게 하여 골고루 풀기 에 편리하도록 해야 한다

3） 조직을 일정한 비율로 예냉에 넣다PBS는(사용하기 전에 프로테아제 억제제를 첨가한다) 균일한 풀을 넣고 균일한 풀을 먹을 때 얼음이나 얼음욕에 넣는다.(일반적으로 조직 무게:PBS는부피=1:9의 비례가 균일한 풀, 예를 들어1g의 조직 샘플 대응9ml의PBS는, 구체적인 부피는 실험수요에 따라 적당히 조정할수 있으며 검측후 견본농도를 계산할 때 상응한 희석배수를 곱해야 한다.)

4） 균일한 장액을 원심관에 흡수하여4℃5000xg의원심5~10분, 잘 찾아서,-20℃ 또는-80℃ 로 보관하여 반복적으로 얼지 않도록 한다.

6、 소변, 타액 등 기타 액체 생물 샘플

1000×g의원심20분, 찾으면 검사할 수 있습니다.

전반적으로, 왜냐하면ELISA는가용성 단백질의 함량만 검사할 수 있기 때문에 모든 샘플이 맑은 액체이고 침전이나 부유물은 원심에서 제거해야 한다.

테스트의 정확성을 보장하기 위해-20℃ 또는-80℃ 의 샘플은1~6개월 이내에 검사합니다.4℃ 보존된 견본은1주 내에 검사를 진행하다.

또한, 견본이 포함되지 않도록 보장해야 한다NaN₃왜냐하면NaN₃억제HRP는의 활성은 가짜 음성의 결과를 초래한다.