생쥐ELISA는시약함의 예비실험절차는 견본처리, 표준품희석 및 조건최적화에 중점을 두어야 하며 다음은 관건적인 조작절차이다.

하나,샘플 준비

혈청/혈장: 실온 응고10-20분 후 원심 분리 (2000-3000회전/분,20분), 상청을 수집하고 침전을 피한다.

세포상청: 원심분리후 청을 취하고 세포내의 성분을 검사하려면 반복적으로 동결분해세포를 해야 한다.

조직 샘플: 골고루 풀을 먹인 후 원심, 상청 분장 보존。

2.표준품 희석

표준품 원액 을 희석액 에 넣어 고정 하다10분 후에 섞고 설명서에 따라 그라데이션(예:1600 IU/mL）。

사전 실험으로 희석 비율을 검증하여 샘플 농도가 검사 범위 내에 있는지 확인하는 것이 좋습니다.

셋,시약 균형과 샘플링

시약함 및 견본은 실온 균형이 필요하다60분, 온도가 반응에 영향을 주지 않도록 한다.

샘플을 추가할 때 기포를 피하고, 표준품 구멍과 샘플 구멍을 각각 첨가한다15-100μL, 빈 구멍에 희석액。

4. 부화와 세척‌

첫 번째부화 (37℃60-120분) 후 세판3-5번, 매번 담그다1-2분.

효소 표지 항체 부화 (37℃30-60분) 후 세탁을 반복합니다.

다섯,발색과 끝

가입TMB는바탕물 피광 반응10-15분, 종료액 (50μL/구멍) 종료 후15분내 측정OD는값.

6. 주의사항

예비실험건의: 고농도견본은 희석검증하여 표곡범위를 초과하지 않도록 해야 한다.

반복성: 결과 신뢰성을 보장하기 위해 최소한 복공을 설정합니다.

이러한 사전 실험 절차를 통해 시약함의 성능을 검증하고, 최적의 조작 조건, 그리고 당신의 샘플이 직접 정식 실험을 진행하기에 적합한지 확인할 수 있습니다.사전 실험은 시간과 시약을 소비하지만 정식 실험의 성공률과 결과의 신뢰성을 크게 높일 수 있다.‌