에서인간 세포 ELISA 키트에서는 다음과 같은 다양한 실험 조건을 선택하는 것이 중요합니다.

　　

1. 고체담체의 선택: 많은 물질은 모두 고체담체로 될수 있다. 례를 들면 폴리염화비닐, 폴리스티렌, 폴리아크릴아미드, 섬유소 등이다.형식은 오목판, 시험관, 구슬 등이 될 수 있다.현재 흔히 쓰이는 것은 40개의 폴리스티렌 오목판이다.어떤 담체든 사용하기 전에 선별할 수 있다: 가방은 같은 양의 항원으로 같은 실험 조건에서 반응하고, 발색 반응이 균일하는지 관찰하며, 그 흡착 성능이 양호한지 판단한다.

　　

2. 가방이 항체 (또는 항원) 의 선택: 항체 (또는 항원) 가 고체 캐리어 표면에 흡착될 때 순도가 좋아야 하며, 일반적으로 pH가 9.0~9.6 사이여야 한다.흡착온도, 시간, 단백질의 양도 어느 정도 영향을 미친다.보통 4 ℃ 에서 18-24시간을 사용한다.적합한 단백질 팩 피농도를 적정해야 한다: 즉 서로 다른 단백질 농도 (0.1, 1.0, 10μg/ml 등), 다른 시험 조건에서 양성 샘플의 OD값을 동시에 관찰한다.OD값 zui가 크고 단백질량 zui가 작은 농도를 선택합니다.대부분의 단백질에 대해 일반적으로 1-10μg/ml입니다.

　　

3. 효소표시항체의 작업농도의 선택: 우선 직접인세포 ELISA 시약함 ELISA법으로 초기효가를 적정한다 (효소표시항체 부분 참조).그런 다음 다른 조건을 고정하거나"방진법"(코팅, 측정 대기 샘플의 비교 샘플과 효소 표시 항체는 서로 다른 희석도) 을 사용하여 공식 실험 시스템에서 작업 농도를 정확하게 측정합니다.

　　

4. 효소 바탕과 수소 공급체의 선택: 수소 공급체의 선택은 저렴하고 안전하며 발색 반응이 뚜렷하고 무색이어야 한다.일부 수소 공급체 (예: OPD 등) 는 잠재적인 발암 작용을 가지고 있으므로 보호해야 한다.조건이 허락된다면 현재 비교적 만족스러운 수소 공급체인 TMB와 ABTS와 같은 비발암성과 매우 민감한 수소 공급체를 사용해야 한다.바탕물이 일정 기간 작용한 후에는 강산이나 강염기를 첨가하여 반응을 중지해야 한다.일반적으로 바탕물의 작용 시간은 10-30분이어야 한다.베이스 용액은 반드시 신선하게 조제해야 하며, 특히 사용하기 전에 H2O2를 넣어야 한다.