5637명 방광암세포

회사 제품은 과학 연구 연구에만 사용되며 임상 진단에 사용할 수 없습니다!

세포계/주:

1. 세포계(Cell Line): 원대배양무는 대대로 성공하면 세포계로 되며 원대배양물에 원래 존재하던 세포세계(Lineage of Cells)로 구성된다.

2. 세포주(Cell Strain): 선택법이나 복제 형성법을 통해 원래 배양물이나 세포계에서 특수한 성질을 가지거나 표지물을 얻어 세포주라고 한다.세포주의 특수한 성질이나 표지는 반드시 전체 배양 기간에 시종 존재해야 한다.계속 전대되지 않거나 전대수가 제한되면 유한세포주(finitecell strain)라고 한다.연속적으로 대물림이 가능하다면 연속세포주(continuous cell strain)라고 한다.인간의 종양세포는 체외에서 반년 이상 배양되어 성장이 안정되고 연속적으로 대물림되는 것을 연속성주 또는 계라고 할 수 있다.

(1) 초대 배양

초대배양은 원대배양이라고도 하는데 체내에서 직접 꺼낸 세포와 조직, 기관을 대상으로 하는 1차 배양물이다.일단 이미 전대배양(Subculture)을 한 세포는 더 이상 초대배양이라고 부르지 않고 세포계로 개칭한다.

(2) 세포계

초대 배양물이 처음 대를 물려 배양되기 시작한 후의 세포를 세포계라고 한다.세포계의 생존 기간이 제한되면 제한된 세포계(Finite Cell Line)라고 합니다.연속 세포계 또는 무한 세포계(Infinite Cell Line)라는 무한 번식 능력을 획득하여 지속적으로 생존할 수 있는 세포계.무한세포계는 대부분 이미 이배화가 발생하였고 이배체핵형을 구비하였으며 어떤 세포는 이미 악성세포로 되였을수도 있기에 본질적으로 이미 전환이 발생한 세포계이다.무한세포계에는 영생성 (또는 불사성) 만 있지만 접촉 억제와 무이체 접종 발암성은 남아 있다.어떤 사람은 영생성이 있을뿐만아니라 이체접종도 종양을 일으키는 성질이 있는데 이는 이미 악성화되였음을 말해준다.이 두 가지 서로 다른 성질의 무한 세포계는 국내외 문헌에서 이런 명사에 대한 응용도 항상 매우 엄격하지 않다.개념상의 명확성을 위해, 이 책은 악성이 있는 무한 세포계에 대해 채택하고 있다!° 악성전환 세포계!± 라는 단어는 더 타당할 수 있다는 것을 나타낸다.영생성만 있고 악성이 없는 세포계에는 무한세포계나 전환세포계로 하면 된다.현재 전해지는 NIH3T3, Rat-1, 10T1/2 등은 모두 이런 세포계에 속한다.

세포 배양 조작:

1) 소생세포: 세포현액 1mL를 함유한 동존관을 37℃ 수욕에서 빠르게 흔들어 해동하고 배지 4mL를 첨가하여 골고루 혼합한다.1000rpm 조건에서 원심분리 3min, 상청액을 버리고 배지 1~2mL를 첨가한 후 고루 분다.그리고 모든 세포현액을 적당량의 배양기가 함유된 배양병에 넣어 밤을 새운다(또는 세포현액을 6cm그릇에 넣고 약 4mL의 배양기를 넣어 밤을 새운다).다음 날 환액하고 세포밀도를 검사한다.

2) 세포 대물림: 세포 밀도가 80~90% 에 달하면 대물림 배양을 할 수 있다. a、상청 배양을 버리고 칼슘, 마그네슘 이온이 함유되지 않은 PBS로 세포를 1~2회 윤색한다.

b、소화액 1mL(0.25% Trypsin-0.53mM EDTA)를 배양병에 넣어 소화액을 모든 세포에 적셔 소화액을 버리고 배양병을 37℃ 배양함에 넣어 1-3min(세포 소화 상태에 따라 다름)을 소화시킨 후 현미경으로 세포 소화 상태를 관찰하고, 세포가 대부분 둥글게 변하고 탈락하면 신속하게 조작대로 가져가 배양병을 몇 번 두드린 후 배양기 -3ml를 종료한다.가볍게 골고루 친 후 무균 원심관에 넣고 1000rpm 원심 5min, 맑은 액체를 버리고 1~2mL 배양액을 보충한 후 골고루 분다. 。

c、세포현액을 1: 2 비율로 배지 8mL를 함유한 새로운 그릇이나 병에 나누어 배지 상자에 넣어 배양한다.

3) 세포동존: 세포의 생장상태가 양호할 때 세포동존을 진행할 수 있다.다음 T25병을 예로 들자;

a、세포를 모아 무균 원심관에 담아 1000rpm 조건에서 4min 원심분리하고 상청액을 버리고 PBS로 한 번 세척해 PBS를 버리고 세포계수를 한다.

b、세포의 수량에 따라 무혈청세포동존액을 첨가하여 세포밀도를 5 × 106~1 × 107/mL로 가볍게 혼합하고 매 동존관마다 1mL의 세포현액을 동존하며 동존관에 주의를 돌려 표식을 잘해야 한다.

c、냉동 보관관을 -80 ℃ 냉장고에 넣고 24h 후에 액체 질소 관개 저장에 넣는다.다음에 받을 수 있도록 냉동 보관소의 위치를 기록하세요.

회사에서 판매 중인 제품: