오리 배아 간간 충질 줄기세포

세포 소개:

오리 배아 간 간 간 충질 건조는 배아 간 조직에서 분리된다.간은 신체내의 대사기능을 위주로 하는 기관으로서 신체내에서 산화제거, 간당저장, 분비성단백질의 합성 등 역할을 한다.간도 소화계통의 담즙을 만든다.간은 기체 내장 속의 큰 기관으로 기체 중의 복부 위치에 위치하며, 오른쪽 횡격막 아래에서 담낭의 앞부분과 오른쪽 신장의 앞부분, 위의 위쪽에 위치한다.간은 기체 소화기 계통의 큰 소화선으로, 적갈색이다V자형 기관.간은 요소 합성의 주요 기관이자 신진대사의 중요한 기관이다.간충질 줄기세포 (MSC는)는 고도의 자기 갱신과 다방면의 분화 잠재력을 가진 줄기세포다.서로 다른 유도조건에서 다양한 조혈모세포 이외의 조직세포로 분화할 수 있으며 조혈지원, 면역조절, 조직복원 등의 역할을 한다.간충질 줄기세포 (MSC는) 는 자기갱신과 다방면의 분화잠재력을 가진 성체줄기세포로서 골수, 지방조직, 탯줄혈액 및 여러가지 태아조직에 존재한다.다양한 세포인자와 성장인자를 분비하여 조혈모세포(HSC는)의 증식과 분화.MSC는면역 조절, 항염, 조직 복원 작용도 있어 이식물 항숙주병(GVHD는) 및 기타 이식 관련 합병증.배아간 비실질 세포에 함유되어 있다MSC는그리고 양이 많아 씨앗 세포가 될 수 있다.

방법 소개:

실험실에서 분리된 오리 배아 간간 충질 건조 채택-콜라겐 효소 결합 소화 법제가 준비되어 있는데, 세포 총량은 대략5×10⁵세포/병.

품질 검사:

실험실에서 분리된 오리 배아 간간 충질경CD44는면역 형광 감식, 순도 도달90%이상, 포함하지 않음HIV-1은、HBV는、HCV는, 지원체, 세균, 효모와 진균 등.

육성 정보:

배양기: 포함FBS는、EGF는、bFGF는、페니실린、스트레프토미신기다리다

환액 주파수: 매2-3하루에 한 번 액체를 바꾸다

성장 특성: 벽 부착

세포 형태: 섬유질 세포 모양

세대 간 특성: 전달 가능3-5좌우를 대신하다

소화액:0.25%

배양조건: 기상: 공기,95%；CO2는，5%

오리 배아 간간 충질 건체외 배양 주기가 제한되어 있습니다.이 세포의 좋은 배양 상태를 보장하기 위해 배양할 수 있는 전용 생장 배지 및 정확한 조작 방법을 조합하여 배양하는 것을 권장한다.

세포 대물림 단계:

세포 밀도가 80~90%에 달하면 대물림할 수 있다.
1. 상청 배양을 버리고 칼슘, 마그네슘 이온이 함유되지 않은 PBS로 세포를 1~2회 윤색한다.
2.소화액 2ml (0.25% Trypsin-0.53mM EDTA) 을 배양병에 넣고 37 ℃ 배양상자에 넣어 1~2분 동안 소화시킨 다음 현미경으로 세포의 소화 상황을 관찰한다. 만약 세포가 대부분 둥글게 변하고 탈락하면 신속하게 조작대로 가져가 배양병을 몇 번 두드린 후 소량의 배양기를 넣어 소화를 종료한다.
3. 6-8ml/병에 따라 배양기를 보충하고 가볍게 두드린 후 빨아들여 1000RPM 조건에서 4분간 원심을 분리하고 청액을 버리고 1-2mL의 배양액을 보충한 후 고루 분다.
4. 세포현액을 1:2에서 1:5의 비율로 배지 8ml를 함유한 새 그릇이나 병에 나눈다.

세포 소생 단계:

세포현액 1mL를 함유한 동존관을 37℃ 수욕에서 빠르게 흔들어 해동하고 배지 4mL를 넣어 골고루 섞는다.1000RPM 조건에서 4분간 원심을 분리하고 상청액을 버리고 1-2mL 배양기를 보충한 후 골고루 분다.그리고 모든 세포현액을 배양병에 넣어 밤을 새운다(또는 세포현액을 10cm그릇에 넣고 약 8ml의 배양기를 넣어 밤을 새운다).다음 날 환액하고 세포밀도를 검사한다.

세포 동결 저장 단계:

세포의 생장 상태가 양호할 때 세포 동존을 진행할 수 있다.다음 T25병을 예로 들자;
1. 세포가 동존할 때 배양기를 버린 후 PBS가 병 밑을 1~2회 세척한 후 1ml를 첨가하고, 세포가 둥글게 되어 탈락한 후 2ml의 배양기를 첨가하여 소화를 종료하며, 혈구계수판 계수를 사용할 수 있다.
2.1000RPM 원심분리 5분 상청 제거.혈청으로 중부상하고 DMSO를 더해 최종 농도는 10% 다.DMSO를 넣은 후 신속하게 혼합하여 1ml당 수량에 따라 냉동보관소에 분배하고 냉동보관관이 표시를 잘 하도록 주의한다.당사는 각 동존관 세포 수에 따라 1X106개의 세포 동존보다 크다.
3.냉동 보관관을 프로그램 냉각 박스에 넣고 -80도 냉장고에 넣고 적어도 2시간 후에 액체 질소 관개 저장에 들어간다.다음에 받을 수 있도록 냉동 보관소의 위치를 기록하세요.
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