기관지 상피세포

기관지 상피세포

세포 기본 속성:

세포 소개:기관지 상피세포자가기관 조직 분리하기;기관(Trachea), 호흡기의 일부;뒷벽이 약간 평평한 원통형 파이프 모양입니다.상단은 제6경추하연을 평평하게 하고 환상연골과 련결된다.아래쪽으로 제4, 5흉추체 (상당히 흉골각평면) 접경지대에 이르러 왼쪽, 오른쪽 주기관지로 나뉘며 갈라진 곳을 기관가지라고 한다.기관지는 주로 14~16개의 반환상연골로 구성되였는데 탄성이 있으며 연골은"C"자형의 연골환으로서 부족점이 뒤로 향하고 각 연골환은 인대로 련결되며 환후방의 부족점은 평활근과 치밀결단조직으로 련결되여 지속적으로 벌리는 상태를 유지하였다.관강은 점막을 받치고 표면은 섬모의 상피를 덮으며 점막에서 분비되는 점액은 공기중의 먼지알갱이에 달라붙을수 있으며 섬모는 끊임없이 인두부로 흔들어 점액과 먼지를 배출하여 흡입한 기체를 정화한다.기관지상피는 기도가 외부환경과 접촉하는 첫 방어선으로서 각종 병원체, 염증매체가 작용하는 표적세포일뿐만아니라 효과세포로 합성되고 여러가지 염성매체와 세포인자를 방출하여 기도의 염증 및 면역반응에 참여하게 된다.체외에서 배양된 원대기관 상피세포는 체내 조직과 형태 구조와 기능 활동에 있어 유사성이 크기 때문에 기초 및 임상 연구에서 매우 중요하다.

가방 피조건: 쥐꼬리 콜라겐 Ⅰ(2-5μg/cm2)

배양기: FBS, 성장첨가제, Penicillin, Streptomycin 등 포함

환액 빈도: 2-3일에 한 번씩 환액

소화액: 0.25%

배양조건: 기상: 공기, 95%;CO2，5%

원대 세포 배양 방법:

1. 준비: 각종 소독된 배양용품을 취하여 정화대에 놓고 자외선을 20분간 소독한다.일을 시작하기 전에 먼저 손을 씻고 75% 의 알코올로 손을 팔꿈치까지 닦는다.

2.배치: 알코올 램프에 불을 붙이고 빨대 모자를 설치합니다.

3.조직 처리: 비커에 조직 블록을 넣고 Hanks액으로 2~3회 헹구어 혈흔을 제거한다.조직이 오염될 수 있다고 의심되면 먼저 푸른 혼합액에 30~60분 정도 넣어두면 된다.

4. 잘라내기: 안과 가위로 조직을 2~3mm 크기로 잘라 소화를 돕는다.조직 블록의 총량보다 30~50배 많은 액을 넣은 다음 삼각 플라스크에 함께 부어 병 입구를 묶거나 마개를 막는다.

5.소화: 또는 항온수욕, 또는 37 ℃ 온도상자에 넣어 소화할수 있으며 소화중 20분마다 한번 흔들어야 한다. 례를 들면 전자기항온교반기로 소화하는것이 더욱 좋다.소화 시간은 조직 블록의 크기와 조직의 경도에 따라 달라집니다.

6.분리: 소화 과정 중 소화액이 혼탁해지는 것을 볼 때, 빨대로 약간의 소화액을 빨아들여 거울 아래에서 관찰할 수 있다. 만약 조직이 이미 세포단 또는 단일 세포로 분산되어 즉시 소화를 종료하고, 즉시 적합한 스테인리스강 체를 통해 아직 충분히 소화되지 않은 조직 블록을 여과한다.저속(500~1000회전/분) 원심소화액 5분, 상청을 흡입하고 혈청이 함유된 배양액을 적당량 넣는다.

7.계수: 계수판으로 계수한다. 례를 들면 세포현액세포밀도가 너무 크면 다시 배양액을 보충하여 조정한후 배양병에 나누어 넣는다.대부분의 세포에 대해 pH는 7.2~7.4 범위여야 하며 배양액은 약간 붉은색을 띠고있는데 례를 들면 색이 노란색으로서 액체가 산성화되였음을 설명하며 NaHCO3로 조절할수 있다.

8.배양: 36.5 ℃ 온도상자에 넣어 배양한다. 만약 CO2 온도상자로 배양한다면 병뚜껑을 반바퀴 돌려야 한다.

주의사항:

1.배양은 4℃ 조건에 기초하여 3~6개월간 보존할 수 있다.

2. 세포 배양 과정에서 무균 조작을 유지하도록 주의하십시오.

3.전대 배양 과정 중, 소화 시간이 너무 길어서는 안 된다, 그렇지 않으면 세포 밀착 벽 및 그 성장 상태에 영향을 줄 수 있다.

4.고객이 세포를 받은 후 처음 3일 동안 배수마다 세포 사진을 몇 장씩 찍고, 세포 상태를 기록하여 화기애애하게 할 것을 건의한다

술부 소통;운송의 원인으로 인해 개별 민감한 세포에 불안정한 상황이 발생할 수 있으니, 즉시 우리에게 연락하여 우리의 기술자가 문제가 해결될 때까지 추적하고 답방할 수 있도록 세포의 구체적인 상황을 상세히 알려주십시오.

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