인담낭 동맥 내피세포

인담낭 동맥 내피세포

세포 기본 속성:

세포 소개: 담낭,오른쪽 갈비뼈 아래 간 뒤쪽에 있는 배 모양의 주머니 구조로 담즙을 농축하고 저장하는 역할을 한다.담낭벽은 점막, 근층, 외막 세 층으로 이루어져 있다.동맥은 내막, 중막, 외막으로 구성되는데 그중 내막은 주로 내피세포로 구성된다.

배양기: 원대 내피세포 배양체계

환액 주파수: 매2-3일에 한 번씩 환액

소화액:0.25% 인슐린 백색 효소

배양 조건: 기상: 공기, 95%CO2 ，5%

원대 세포 배양 방법:

1. 준비: 각종 소독된 배양용품을 취하여 정화대에 놓고 자외선을 20분간 소독한다.일을 시작하기 전에 먼저 손을 씻고 75% 의 알코올로 손을 팔꿈치까지 닦는다.

2.배치: 알코올 램프에 불을 붙이고 빨대 모자를 설치합니다.

3.조직 처리: 비커에 조직 블록을 넣고 Hanks액으로 2~3회 헹구어 혈흔을 제거한다.조직이 오염될 수 있다고 의심되면 먼저 푸른 혼합액에 30~60분 정도 넣어두면 된다.

4. 잘라내기: 안과 가위로 조직을 2~3mm 크기로 잘라 소화를 돕는다.조직 블록의 총량보다 30~50배 많은 액을 넣은 다음 삼각 플라스크에 함께 부어 병 입구를 묶거나 마개를 막는다.

5.소화: 또는 항온수욕, 또는 37 ℃ 온도상자에 넣어 소화할수 있으며 소화중 20분마다 한번 흔들어야 한다. 례를 들면 전자기항온교반기로 소화하는것이 더욱 좋다.소화 시간은 조직 블록의 크기와 조직의 경도에 따라 달라집니다.

6.분리: 소화 과정 중 소화액이 혼탁해지는 것을 볼 때, 빨대로 약간의 소화액을 빨아들여 거울 아래에서 관찰할 수 있다. 만약 조직이 이미 세포단 또는 단일 세포로 분산되어 즉시 소화를 종료하고, 즉시 적합한 스테인리스강 체를 통해 아직 충분히 소화되지 않은 조직 블록을 여과한다.저속(500~1000회전/분) 원심소화액 5분, 상청을 흡입하고 혈청이 함유된 배양액을 적당량 넣는다.

7.계수: 계수판으로 계수한다. 례를 들면 세포현액세포밀도가 너무 크면 다시 배양액을 보충하여 조정한후 배양병에 나누어 넣는다.대부분의 세포에 대해 pH는 7.2~7.4 범위여야 하며 배양액은 약간 붉은색을 띠고있는데 례를 들면 색이 노란색으로서 액체가 산성화되였음을 설명하며 NaHCO3로 조절할수 있다.

8.배양: 36.5 ℃ 온도상자에 넣어 배양한다. 만약 CO2 온도상자로 배양한다면 병뚜껑을 반바퀴 돌려야 한다.

참고 사항:

1.배양은 4℃ 조건에 기초하여 3~6개월간 보존할 수 있다.

2. 세포 배양 과정에서 무균 조작을 유지하도록 주의하십시오.

3.전대 배양 과정 중, 소화 시간이 너무 길어서는 안 된다, 그렇지 않으면 세포 밀착 벽 및 그 성장 상태에 영향을 줄 수 있다.

4.고객이 세포를 받은 후 처음 3일 동안 배수당 각각 몇 장의 세포 사진을 찍어 세포 상태를 기록하여 기술부와 쉽게 소통할 수 있도록 건의한다;운송의 원인으로 인해 개별 민감한 세포에 불안정한 상황이 발생할 수 있으니, 즉시 우리에게 연락하여 우리의 기술자가 문제가 해결될 때까지 추적하고 답방할 수 있도록 세포의 구체적인 상황을 상세히 알려주십시오.

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