인폐 미혈관 내피세포

1. 세포 기본 속성

세포 이름:인폐 미혈관 내피세포

조직 출처: 폐 조직

종속 출처: 사람

제품 사양: 5 × 105cells/T25 세포 배양병

세포 소개:인폐 미혈관 내피세포자폐 조직 분리하기;폐는 기체의 호흡기관으로서 흉강에 위치해있으며 좌우가 각각 하나이고 심장우에 덮여있다.폐에는 분엽이 있는데, 왼쪽에서 두 번째, 오른쪽에서 세 번째, 모두 다섯 잎이다.폐경폐계 (기관, 기관지 등을 가리킴.) 는 목구멍, 코와 연결되어 있기 때문에 목구멍을 폐의 문호라고 하고, 코는 폐외요라고 한다.미혈관 내피세포는 재생, 발육, 상처 치유 등 일련의 생리 및 염증 반응에 밀접하게 참여한다.세포는 북형이나 다각형으로 단층을 형성한 후 자갈모양이나 포장석모양으로 배열된다.폐미세혈관 내피세포는 반선택성 장벽을 구성하는데, 이 장벽은 폐 기체의 교환에 있어서 액체와 가용물의 혈액과 폐 간질 사이의 흐름을 조절하는 데 중요한 의미를 가진다.

패키지 조건: PLL(0.1mg/ml), 젤라틴(0.1%)

배양기: FBS, 성장첨가제, Penicillin, Streptomycin 등 포함

환액 빈도: 2-3일에 한 번씩 환액

성장 특성: 벽 부착

세포 형태: 내피 세포 샘플

세대 간 특성: 2-3세대 가능

전대 비율: 1: 2

소화액: 0.25%

배양조건: 기상: 공기, 95%;CO2，5%

2. 사용방법:

인폐 미혈관 내피세포일종의 밀착세포로서 세포형태는 내피세포견본으로서 기술부의 표준조작절차하에서 세포는 2~3세대로 전파될수 있다.세포를 받은 후 가능한 한 빨리 관련 실험을 진행하는 것이 좋습니다.

고객은 세포를 받은 후 다음과 같은 방법으로 조작하십시오.

1.T25 세포배양병을 꺼내 75% 의 알코올로 병의 몸을 소독하고 봉인막을 뜯어내고 37 ℃, 5% CO2, 포화습도의 세포배양함에 넣어 3-4h를 정치하여 세포상태를 안정시킨다.

2. 밀착세포 소화

1) T25 세포배양병의 배양기를 빨아들여 PBS로 세포를 한 번 세척한다.

2) 소화액 0.25% 1mL에서 T25 배양병에 첨가하여 배양병을 가볍게 돌려 소화액이 배양병 바닥 전체를 덮은 후 여분의 소화액을 빨아들여 37 ℃ 온욕 1-3min;거꾸로 현미경으로 관찰한 후 세포가 다시 축소되어 둥글게 변한 후 다시 5ml 배양기를 첨가하여 소화를 종료한다;

3) 빨대로 가볍게 불어 섞어 전대 비율로 T25 배양병을 접종하여 전대한 후 신선한 배양기를 5mL까지 보충하여 37 ℃, 5% CO2, 포화습도의 세포배양함에 넣어 조용히 배양한다.

4) 세포가 벽에 붙으면 배양하여 관찰한다.이후 환액 빈도에 따라 신선한 배양기를 교체한다.

3.세포 수거 탈락

1) 모든 세포현액, 1000rpm, 원심 5min을 수집하여 침전을 보존한다.

2) 0.25% 소화액 0.5mL를 원심관에 첨가하여 중현침전하여 37 ℃ 소화 3min (또는 4 ℃ 냉장고 정지 5-7min) 에 놓는다.소화가 끝나면 원심관에 배지 5ml를 넣어 소화를 종료한다.

3) 1000rpm, 원심 5min을 거쳐 상청을 버리고 5ml배지로 중현침전하여 새로운 배양병에 접종한다.

4) 세포가 벽에 붙으면 배양하여 관찰한다.이후 환액 빈도에 따라 신선한 배양기(37℃ 예열)를 교체한다.

5) 원병내접벽세포는 정상소화처리한다.

4. 세포 실험

원래 세포의 벽 붙이기 특수성으로 인해 벽에 붙인 원래 세포가 소화 후 다른 실험 그릇 (예를 들면 유리 파편, 배양판, 공초점 배양 그릇 등) 으로 전이될 때 실험 그릇에 이불을 싸서 세포의 벽 붙이기 특성을 강화하고 세포가 잘 붙이지 않아 실험에 영향을 주지 않도록 해야 한다;포피조건은 쥐꼬리콜라겐Ⅰ(2-5μg/cm2), 폴리우레탄PLL(0.1mg/ml), 젤라틴(0.1%)을 많이 선택하여 세포종류에 따라 정한다.부유 / 반부유 세포는 이불을 싸지 않아도 된다.

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세포배양 주의사항:

원대세포 배양에 관한 주의사항.원대세포배양은 아주 중요한 실험기술로서 이런 주의사항을 잘 파악하면 당신의 실험을 더욱 순조롭게 할수 있다.

우선 무균 조작이 관건이다.반드시 조작환경의 청결을 유지하여 세균이나 곰팡이의 오염을 피해야 한다. 그렇지 않으면 실험은 실패할 것이다.

둘째, 적합한 배양기와 혈청을 선택하는 것도 중요하다.세포마다 배지와 혈청에 대한 수요가 다르기 때문에 세포 유형에 따라 적합한 배지와 혈청을 선택해야 한다.

또 세포 배양에 들어있는 성분이기도 하다.신선하게 조제하려면 저장 과정에서도 정기적으로 보충해야 한다.

세포 배양 과정에서 정지 배양도 매우 중요하다.세포는 소화 분리 후 새로운 환경에 적응하는 데 일정한 시간이 필요하기 때문에 이 기간 동안 배양병을 자주 꺼내 관찰하는 것을 피해야 한다.

소화 시간도 적절히 조절해야 한다.보통 육안으로 미세한 조직 입자를 볼 수 있을 정도로 소화하면 되는데, 너무 긴 소화 시간은 세포 손상을 가중시켜 세포 배양의 활착률에 영향을 줄 수 있다.

마지막으로 일부 특수한 류형의 세포에 대해서는 일부 특수한 성장인자를 첨가하여 세포의 생장과 증식을 촉진해야 할수도 있다.그러나 이러한 성장 인자의 비용은 일반적으로 높습니다.