쥐 헤모글로빈(MYO/MB) 키트 ELISA 운영 프로세스:

(1), 측정 대기 샘플 구멍에 각 구멍에 측정 대기 샘플 100 μ1을 추가하고 각 샘플에 3 개의 평행 구멍을 설정합니다.두 개의 음성 대조 구멍을 설정하고, 각 구멍마다 처리되지 않은 구멍을 추가합니다.

그룹의 세포분해액 100μ1;별도의 공백 대조 구멍을 만들어 순수 세포 분해액 100μ1을 넣는다.

(2) 효소표지판은 4 ℃ 를 설치하고 가방은 밤을 지낸다.

(3) 세척판: 구멍 내 반응액을 빨아들여 세척액으로 한 번 세척(세척액을 판공에 가득 채운 후, 바로 뿌리기)한 후 세척액을 판자에 가득 채운다

구멍, 1~2분 정도 담그고 간헐적으로 흔들어요.구멍 안의 액체를 털어낸 후 흡수지에 두드려 말리다.3 ~ 4회 반복 세탁.

(4) 음성대조구멍은 구멍당 PBS50 μ1, 시료구멍 및 공백구멍은 구멍당 1: 500 희석된 무항인 AIF 항체 작업액 50 μ1을 첨가한다.

(5) 효소표판은 37 ℃ 배양상자의 습함에 설치하고 60min 부화한다.

(6) 세판, 같음 (4).

(7) 구멍당 1:5000 희석된 HRP-표기된 염소 항면항체 작업액 100 μ1.

(8) 효소표판은 37 ℃ 배양상자의 습함에 설치하고 60min 부화한다.

(9) 세판, 같음 (4).

(10) 구멍마다 TMB 발색액 100μ1을 넣고 10s를 가볍게 섞어 37 ℃ 어두운 곳에 15-20min 반응시킨다.

(11) 구멍당 100 μ 12mo1/LH2S04를 더하여 반응을 종료한다.

(12) 450nm 흡광값 V1과 630nm 흡광값 V2를 각각 측정하고 최종적으로 측정한 0D값은 량자의 차(V1-v2)로 용기에서 감소시킨다

의 스크래치나 지장 등으로 인한 빛 간섭.

(13) 데이터 처리: 표본(S)과 음성 대조(N)의 OD값을 도출한 후 S/N 값을 계산한다.S/N>2.1은 양성 판정 기준이다.