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측정 단계:
1. 효소표시기는 30min 이상 예열하고 파장을 450nm까지 조절한다.
2. 시약 3의 희석: 시약 3용 증류수를 50배 희석하여 사용하는 만큼 배합한다.(시약 3과 증류수 1:49 희석.
3. 작업액 조제: 시약 1에 100μl 시약 2를 첨가하여 충분히 혼합한다.잘 배합된 시약은 4 ℃ 의 피광으로 일주일간 보존할 수 있다.(일회용 측정 샘플이 적으면 실제 용량에 따라 시약 1과 시약 2를 20ml: 0.1ml의 비율로 혼합하여 조제할 수 있다.)
4, 시약 한 병을 4용 5ml 증류수로 용해(용해 후 일주일 이내에 다 쓴다).
5. 샘플 측정(96공판 순서대로 아래 시약을 첨가)
특별히 주의를 환기시킨다: 본 제품은 과학연구연구에만 사용되며 인체림상에서 직접 검사하는데 사용되여서는 안된다.
제품명 |
|
규격 |
100관 / 48종 |
검사 방법 |
미량법 |
상품 번호 |
BJ-01S9606 |
상품 소개:
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측정 의미: GOD(EC 1.1.3.4)는 동물, 식물에 널리 존재하며 포도당의 산화를 촉진하여 포도당산을 생성하고 H2O2를 생성하는데 이는 생물체에서 활성산소를 생성하는 대사경로의 하나이다. 측정 원리: GOD는 H2O2를 촉매하여 생성하고, 과산화물 효소는 유산소가 존재할 때 H2O2를 촉매하여 분해하여 생성된 산소는 또 인접 희향아민을 산화시켜 유색 물질을 생성하며, 색깔의 깊이와 옅음은 포도당 산화 효소의 활성과 선형 관계를 이룬다. 테스트에 필요한 장비 및 장비: 가시분광광도계/효소표시기, 수욕솥, 탁상원심분리기, 조절식이액기, 미량석영비색그릇/96공판, 연구발, 얼음, 증류수. |
응고 방지 고려 사항 선택:
①, 각 샘플에 첨가된 항응고제의 양은 일치해야 하며, 동시에 채취한 전혈의 양도 가능한 한 일치해야 한다;
②, 항응고 전혈을 수집한 후 반드시 가볍게 전도하여 충분히 항응고하여 일부 혈액이 항응고제에 접촉하지 않아 응고하는 것을 방지한다;
③, 항응고전혈로 수집한 혈장이 상대적으로 많다(1ml의 항응고전혈은 0.4~0.5ml의 혈장을 분리할 수 있다).
④ 항응고로 수집한 혈장을 냉동 보관한 후 해동 시 솜 모양의 혼탁이 나타날 수 있으며, 있을 경우 원심에서 혼탁을 제거한 후 측정에 사용한다.
조작 단계:
실험이 시작되기 전에 각 시약은 모두 실온으로 균형을 맞춰야 한다 (시약은 직접37 ℃ 용해);시약이나 샘플을 희석할 때는 모두 골고루 섞어야 하며, 골고루 섞을 때는 가능한 한 거품이 생기는 것을 피해야 한다.실험 전에 시료 함량을 예측해야 한다. 예를 들어 시료 농도가 너무 높을 때는 시료를 희석하여 희석한 시료가 시약함의 검측 범위에 부합하도록 하고, 계산할 때 상응하는 희석 배수를 곱해야 한다.
1.샘플링: 빈 구멍, 표준 구멍, 측정 대기 샘플 구멍을 각각 설정합니다.빈 구멍에 샘플 희석액 100 μl, 나머지 구멍은 각각 표준품 또는 측정 대기 샘플 100 μl를 추가하고, 기포가 없도록 주의하며, 샘플을 추가하여 효소 표지판 구멍 바닥에 샘플을 추가하고, 가능한 한 구멍 벽에 닿지 않고, 가볍게 흔들어 섞고, 효소 표지판에 덮개 또는 복막을 더하고, 37 ℃ 반응 120분.실험 결과의 유효성을 보장하기 위하여 매번 실험할 때마다 새로운 표준품 용액을 사용하십시오.
2. 액체를 버리고 털어서 세탁할 필요가 없다.구멍마다 검사용액 A 작업액 100μl(사용 1시간 전 조제), 효소표지판에 복막을 더하면 37℃가 60분간 반응한다.
3.온육 60분 후, 구멍 안의 액체를 버리고, 털어내고, 널빤지를 3회 씻고, 매번 1~2분 담그고, 약 400 μl/구멍을 털어내고(가볍게 두드려 구멍 안의 액체를 말릴 수도 있다).
4.구멍마다 검사용액 B작업액(동일검사A작업액) 100μl, 효소표지판에 복막 37℃ 반응 60분 추가.
5.온육 60분 후, 구멍 안의 액체를 버리고, 털어내고, 널빤지를 5회 씻고, 매번 1~2분 담그고, 350 μl/구멍마다 털어내고(가볍게 두드려 구멍 안의 액체를 말릴 수도 있다).
6.순서에 따라 매 구멍마다 바탕물용액 90μl, 효소표판에 복막 37 ℃ 의 피광현색 (30분내, 이때 육안으로 표준품의 앞 3-4공에 뚜렷한 사다리꼴란색이 있고 뒤 3-4공의 사다리꼴이 뚜렷하지 않으면 중지할수 있다.)
7. 순서에 따라 매 구멍마다 종지용액 50μl를 첨가하여 반응을 중지하고 이때 파란색은 황색으로 입전한다.종지액의 가입 순서는 가능한 한 바탕액의 가입 순서와 같아야 한다.실험 결과의 정확성을 보장하기 위해서, 바탕물 반응 시간이 되면 가능한 한 빨리 종료액을 넣어야 한다.
8. 효소연합기로 450nm 파장에서 각 구멍의 광밀도(OD값)를 순서대로 측정한다.종지액을 넣은 후 즉시 검사를 진행하다.
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