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기본 정보
세포 이름:HEP-53.4 생쥐 간암세포
세포 별칭:HEP-53.4 ; 53.4 ;쥐 간암 세포
세포 공급원:독일
세포감정:STR 인증 통과
세포 형태:상피세포는 벽에 붙어 자란다
배양기:DMEM(NaHCO3 1.5g/L 포함)(BasMed-AW-013)+FBS 10% + P/S1%
배양 조건:기상: 공기, 95%;이산화탄소, 5%온도: 섭씨 37도, 배양함 습도 70~80%
냉동 저장 조건:무혈청동존액, 액질소저장
세포 배경:C57BL/6J 생쥐의 원발성 간세포암에서 유래한 이 생쥐의 간세포는 간세포암을 충실히 대표하고 있으며, 이 유형의 간암을 연구하는 데 가치 있는 모델을 제공하였다. 동의어 HEP-53.4와 53.4는 식별과 교차 인용이 편리하다. 간세포암은 분자 통로, 세포 상호작용, 치료 전략을 정확하게 연구할 수 있는 중대한 건강 문제이다. 이 생쥐의 간세포와 muscu 암의 기원은 이 있다.
세포 용도:과학 연구에만 사용
세포화물기간: 현물, 1주일 정도
주의사항
1. 일반적인 소화는 세포의 원심분리를 수집한다.
2. 원심분리 후 원심관 내상청을 제거하고 중현세포를 1ml 정도 섞어 가볍게 흔들거나 가볍게 세포를 불어 배양함에 넣어 세포를 소화하고 1min 정도 더 소화하는 것을 권장한다.
3. 소화가 잘 되면 이액총으로 세포현액을 가볍게 불어 세포단을 분산시키고 혈청이 함유된 배양기 3~5ml를 신속히 섞어 소화를 중지하고 원심제거한다.
4. 세포에 해당하는 배양기를 5ml 정도 섞어 배양병/그릇에 비례적으로 넣는다.
5. 현미경으로 세포가 균일하게 분산된 단세포가 되는지 관찰한다. 소량의 뭉친 소세포단이 있으면 다시 소화하지 않고 벽에 붙인 후 세포의 성장이 안정된 후에 세포를 소산시킬 수 있다.
상온 발송
접수 후 T25병 소독 재배치 배양함 정지 2~3시간 후 밀도와 상태를 관찰하고 2~3장 사진을 찍어 판매에 피드백하면 밀도가 기준에 도달하면 대물림할 수 있다.전기의 전대 비율 1: 2, 재차장이 후대를 가득 채울 때 그 중 한 병을 1ml의 냉동 보관관으로 동결하고, 다른 한 병은 계속 전대하며, 2-3마리를 반복적으로 동결한 후에야 증폭하여 실험을 하여 돌발 상황이 단종을 일으키는 것을 방지할 것을 건의한다.
드라이아이스 배송일반 세포 출하 냉동 보관관 2마리, 소생 1마리, 다른 한 마리는 예비, 첫 번째 소생이 성공하지 못할 때는 엄격히 공장의 요구에 따라 소생 두 번째, 모두 소생에 성공하지 못한 상황은 즉시 소생 사진을 남겨 우리에게 통지한다.
HEP-53.4 생쥐 간암세포
밀착세포
1. 상청 배양을 버리고 칼슘, 마그네슘 이온이 함유되지 않은 PBS로 세포를 1~2회 윤색한다.
2.0.25%(w/v) 0.53mM EDTA를 배양병(T25병 1-2mL, T75병 2-3mL)에 넣고 37℃ 배양함에 1~2분(소화가 어려운 세포는 소화시간을 적당히 연장할 수 있음) 소화시킨 후 현미경으로 세포의 소화상태를 관찰하고 세포가 대부분 둥글게 변하고 탈락하면 신속하게 조작대로 가져와 배양병을 몇 번 두드린 후 3-4ml 함유된 10BS를 넣어 배양을 종료한다.
3.가볍게 두드린 후 흡출, 1000RPM 조건에서 원심 3-5min, 맑은 액체를 버리고 1-2mL 배양액을 보충한 후 불어준다.세포현액을 1:2의 비율로 새 T25병/6cm 배양접시에 나누고 설명서의 요구에 따라 배치한 새로운 배양기를 6-8ml 첨가하여 세포의 생장활력을 유지하며 후속전대는 실제상황에 따라 1:2~1:5의 비율로 진행한다.
4.세포동존: 세포를 접수한후 배양전 3세대에 일련의 세포종자를 동존시켜 후속실험에 사용할것을 건의한다.
5. 운송용 배양기(관액배양기)는 더 이상 세포를 배양하는 데 사용할 수 없으므로 설명서 세포배양조건에 따라 새로 배합한 배양기로 바꾸어 세포를 배양하십시오.
부유세포
부유상태에서 성장하는 세포는 배양병에 배양기를 첨가하여 세포의 성장상태를 유지할수 있으며 일반적으로 세포밀도를 1×10조~1×10⁶개/mL(세포마다 밀도에 대한 요구가 다름)로 유지하면 세포의 정상적인 성장을 유지할수 있다.만약 분병이 필요하다면 세포현액을 원심관 중 1000rpm, 원심 5min에 수집하여 상청을 버리고 1-2mL의 배양액을 보충한 후 중현을 혼합한 후 세포현액을 1:2의 비율로 새 T25병에 나누고, 6-8ml의 설명서에 따라 배치한 새로운 배양기를 첨가하여 세포의 생장 활력을 유지하며, 후속 전대는 실제 상황에 따라 1:2~14의 비율로 진행할 수 있다.
운송 형식
저온: 1mL 냉동보관관 포장 드라이아이스 운송, 수령 후 -80도 냉장고 보존 후 밤 경과 후 액체 질소 또는 직접 소생, 만약 드라이아이스가 이미 깨끗하게 휘발되었고, 냉동보관관 병뚜껑이 탈락, 파손 및 세포에 오염이 있는 것을 발견하면 즉시 우리에게 연락하십시오.
상온: T25병이 소생된 생존세포는 상온으로 발송되며 접수한후 세포접수후의 처리방법에 따라 조작한다.
생물안전
1.모든 동물 세포는 잠재적인 생물 위해성이 있는 것으로 간주하고, 반드시 2급 생물 안전대 내에서 조작해야 하며, 모든 폐액 및 이 세포에 접촉한 그릇은 멸균한 후에야 버릴 수 있도록 주의해 주십시오.
2. 동존세포를 소생시킬 때 항상 보호장갑, 옷, 보호마스크를 착용하는 것을 권장한다.주의: 냉동 보관관이 액체 질소에 담그면 누출되고 서서히 액체 질소로 가득 찰 수 있습니다.해동 시 액체 질소가 기상으로 전환되어 용기가 폭발하거나 위험력으로 뚜껑을 불어 떨어뜨려 날리는 부스러기가 발생하여 인명 피해를 줄 수 있다.
각별히 주의하다
이 세포는 DMEM(1.5g/LNaHCO3 포함) 배지에서 잘 자라는데, 대부분의 DMEM은 높은 농도의 NaHCO3(3.7g/L)를 함유하고 있어 DMEM(3.7g/L NaHCO3) 배지를 사용하여 세포를 배양할 경우 CO2 농도(7~10%)를 높여야 한다.
