MOC1 세포계

기본 정보

세포 이름:MOC1 세포계

T150 플라스크: 07-200-64

T75 플라스크: 10-126-37

냉동제: 03-374-059

45um 필터: 09-754-21

불활성 스펙트럼: MOC1,22

공격적인 선: MOC2

IMDM : sh30228.02 IMDM 번호

영양 혼합물 F10-F12: sh30026.01 태아 소 혈청, 특징 - 해클론

카탈로그 / 배치 번호: sh30071.03 / AWK24001

필터 병 1L 필터: 09-761-108

과학 시약 목록 번호 인슐린: I6634-50mg

EMD 마이크로홀 시약 목록 번호: 표피 성장 인자(EGF), 재조합자: 01-107

MOC1 세포계

해동 세포계

1. 해동 전에 IMDM MOC 라인 배지 21ml를 T150에 추가(T75로 해동하려면 10ml를 T75에 추가)2. 액체질소를 냉동병에서 꺼내 알코올 70%가 함유된 작은 병을 뿌려 세척한다.

3.냉동병의 하반부를 섭씨 37도의 수욕 (뚜껑이 물에 닿지 않도록 하여 오염을 피한다.) 작은 얼음이 떠다닐 때까지 보관한다.

4. 다시 ETOH로 냉동병을 뿌린 뒤 보닛 위에 올린다.배양액 이액관 1ml를 세포 1ml에 넣고 이 2ml를 이미 배양기가 함유된 T150에 넣는다(T150 하나를 총 22ml로 만든다).

5. T150 플라스크에서 일부 배양기를 취하고 냉동병을 씻은 다음 평판으로 놓아 남아 있는 모든 세포가 냉동병에 남아 있는지 확인한다.

냉동 세포계
1. T150에서 세포 수집

2. 15ml 테이퍼 튜브에서 입자로 회전(1000RPM x 5분)

3. 상청액 배출

4. 원추형 튜브 15ml 클릭, 중현세포

5. 1.5ml IMDM MOC계 배양기 넣어 배양기에서 세포 재건-빙상 유지

6. 튜브가 얼음에 들어갈 때 1.5ml의 냉동 매체를 천천히 첨가한다(IMDM MOC 선 매체에서 냉동 매체 -20% DMSO를 제작한다.예: 20ml 인벤토리 - 16ml IMDM MOC 라인 배양기와 4ml DMSO를 추가합니다.주사기 필터,um필터 사용

7. 1mL당 냉동병 3개

8.섭씨 -80도에서 2주 이상 저장

9. 1~2주 안에 액체질소 용액에

참고:필요한 경우 IMDM 2ml와 냉동배지 2ml로 늘려 작은 병 4개에 저장할 수 있다.또 세포를 냉동하기 전에 세포를 계수해 작은 병에 기록하는 것이 좋다.